zui近，安全**被要求幫助評估干細(xì)胞實驗室是否存在安全隱患。雖然稱它為實驗室可能是個難題。那是一間經(jīng)過改建的儲藏室，現(xiàn)在可容納大約十二個超低溫冰柜和六個半杜瓦瓶，其中包含用于填充冰柜的液氮。就像您想象的那樣，冷凍保存充滿了危險和嚴(yán)重的潛在危險。
冷凍保存已成為研究中發(fā)展zui快的*域之一，尤其是在醫(yī)療和保健*域。目的是存儲活細(xì)胞和細(xì)胞系的儲備，以便在需要時訪問遺傳材料。實際上，技術(shù)的進步使得能夠開發(fā)用于保存各種生物材料的技術(shù)，包括微生物，組織，原代細(xì)胞，已建立的細(xì)胞系，小型多細(xì)胞生物以及復(fù)雜的細(xì)胞結(jié)構(gòu)（例如胚胎）以及核酸和蛋白質(zhì)。只要保持低于-135°C的溫度，就可以將生物材料或細(xì)胞系以懸浮狀態(tài)無限期冷凍，基本上是停止時間。1個
當(dāng)今使用的冷凍保存的主要方法是電冷凍器，液相氮冷凍器和氣相氮冷凍器。zui常用的方法是液氮蒸氣存儲。電冰柜的機械結(jié)構(gòu)復(fù)雜，可提供zui高的存儲溫度，但仍需要備用液氮。液相氮冷凍機提供zui低和zui穩(wěn)定的溫度，以及簡單性和機械可靠性。但是，交叉污染的風(fēng)險和潛在的冷凍管感染2（稍后對此進行詳細(xì)介紹）存在嚴(yán)重的缺陷，這些缺陷使氣相液態(tài)氮冷凍機成為shou選方法。盡管這些方法簡單可靠，并且消除了交叉污染的風(fēng)險，但它們會產(chǎn)生垂直溫度梯度，因此需要對液氮水平和溫度變化進行仔細(xì)而勤奮的監(jiān)測，尤其是在上部區(qū)域。
氮氣似乎無害。畢竟，如果我們回想起中學(xué)時代的科學(xué)，地球大氣中78％是氮。它是一種無色，無味，無味且不可燃的氣體，比空氣輕（分子量為28，相比之下，給定或攝取的干燥空氣為28.96）。但是，正如我們不久將看到的，正是這些特性帶來了危險。
氮氣在-320°F沸騰；因此，液氮非常冷。接觸可能導(dǎo)致嚴(yán)重的凍傷，并可能凍結(jié)和粉碎某些物質(zhì)。當(dāng)它蒸發(fā)時，它膨脹了700倍。當(dāng)壓力升高并超過容器材料的強度（請記住冷凍管）時，這可能導(dǎo)致密封容器爆炸。更重要的是，巨大的膨脹可能會在封閉，密閉或通風(fēng)不良的空間中置換氧氣，從而產(chǎn)生潛在的威脅生命的窒息危險。結(jié)合其無色，無味，無味的特性，您可能不會意識到自己正陷入死亡陷阱。
現(xiàn)在，我們了解到液氮的主要危害是直接接觸，由于加壓而爆炸和氧氣置換。防止這些傷害并減少受傷機會的zui佳方法是培訓(xùn)和適當(dāng)?shù)姆雷o設(shè)備（個人和設(shè)施）。安全**強烈鼓勵在使用液氮的地方開發(fā)書面危害分析和標(biāo)準(zhǔn)操作程序。下面，我們將提供一些指導(dǎo)和建議，以幫助您正確地開始。
當(dāng)進行冷凍保存和使用液氮時，zui嚴(yán)重的危害是潛在的窒息。當(dāng)在容器之間轉(zhuǎn)移時（例如，從杜瓦瓶到冰柜或二級容器等），通過泄壓閥排放的液罐（杜瓦瓶），從泄漏閥以及從打開的容器（進入冷凍柜）轉(zhuǎn)移時，液氮會釋放并蒸發(fā)。確保您的設(shè)施或低溫保存區(qū)域具有足夠的機械通風(fēng)。將氧氣傳感器安裝在呼吸區(qū)高度附近，并制定嚴(yán)格的維護計劃（氧氣傳感器必須經(jīng)過校準(zhǔn)，通常每兩年會磨損一次）。建議將警報設(shè)置點設(shè)置為18％，并將安全條件恢復(fù)到20％或更高。
防止直接接觸是下一個要解決的重要問題。shou先，只有經(jīng)過培訓(xùn)的人員才能使用液氮。確保始終可以使用適當(dāng)?shù)膫€人防護設(shè)備。至少應(yīng)包括護目鏡和面罩，厚皮或低溫手套，實驗室外套，褲子和露趾鞋。解凍冷凍管或小瓶時，請將其放入厚壁的容器中或安全防護罩的后面。避免吸入蒸氣。僅使用批準(zhǔn)的容器來運輸和運輸液氮。攜帶容器遠(yuǎn)離身體和臉部。不要將容器打開或無人看管。
zui后，運輸和轉(zhuǎn)移液氮需要特殊的設(shè)備。以下是有關(guān)這些操作的更多準(zhǔn)則：
